Radiation hybrid mapping är ett gentekniskt förfarande som ursprungligen utvecklades för att konstruera långdistans kartorna över däggdjurskromosomeroch upptäcka lokaliseringen av genetiska markörer i förhållande till varandra . Strålning hybrid kartläggning har sina rötter i en statistisk modell för att mäta avstånden mellan deoxiribonukleinsyra ( DNA ) markörer och deras ordning på kromosomerna . DNA-markörer är mycket korta . Cykliska DNA-sekvenser finns inom ett genom. Strålning hybrid kartläggning har visat sig vara nödvändig för att lokalisera sjukdomsgener mänskliga i genomet . Den relativa placeringen av dessa DNA-markörer kan smält samman till en fysisk karta som kallas en genetisk karta .
Steps of Radiation Hybrid Technique
Det första steget av strålningshybrid tekniken innebär amplifiering och rening av DNA liknar det första steget i en sekvenseringsprojekt . Strålning används sedan för att dela upp DNA i mindre segment och dessa segment införlivas sedan i en hybridcell . Den strålningshybridcelldärefter odlas att odlas i stora mängder. Polymeraskedjereaktion (PCR) och kopplingsanalys används för att lösa avståndet mellan DNA-markörer . Du kan enkelt kontrollera om förekomsten av olika genetiska markörer . Ju närmare de två genetiska markörer är till varandra , är det mindre sannolikt att separeras med DNA - klyvning strålning .
Förfarande /News Technique
förfarandet för strålningshybridteknikinnebär användning av två olika cellinjer som är oförmögen att överleva i en giftig media . Men de innehåller gener som kan motstå den giftiga medier när de kombineras till en enda cell ( på grund av att produktionen av ett toxin resistent enzym ) . Cellinjen som studeras bestrålas (vanligtvis genom röntgen ) , vilket orsakar avbrott i DNA. Detta orsakar i kromosomen för att bryta i flera segment som sedan sammansmälta eller integrerade med den andra cellinje , som producerar en hybrid. Eftersom hybriden har införlivat gener från både cellinjer och kan producera den erforderliga enzymet , kommer den att överleva i den giftiga medier .
Odling
hybridcellsom kan överleva är nu odlas i stora mängder. Detta förstärker DNA ärvs från det bestrålade cellinje . Det erhållna provet utsätts sedan för PCR för att amplifiera två specifika genetiska markörer. Genom att köra PCR-produkterna på en gel , kan det verifieras om att båda markörerna är inkorporerade i den resulterande cellinjen. Frekvenserna som DNA-markörer är kvar i varje klon ( odlade prov ) kan beräknas med hjälp av statistiska metoder .
Ansökan
genererade kartor av kromosomer för flera arter såsom människa , råtta , mus och andra genom att underlätta skapandet av mycket detaljerade och exakta kartor som används för att studera flera faktorer sjukdomar . Andra tillämpningar är bestämning av kromosom platser för 26 nya fullängds cDNA humana ( kromosomalt DNA) . Addera
Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom