att färga en vanlig bakterie , är flytande fläck appliceras till bilden i ungefär en minut , sedan sköljas bort med vatten . Differential färgning använder olika fläckar för två olika bakterier i samma bild. Till exempel, i en Gram-färgning , sliden färgas först med kristallviolett och jod, därefter avfärgades med alkohol. Celler som är grampositiva kommer att behålla den mörka lila färgen på den första fläcken även efter det att alkoholen används , medan gramnegativa celler återgår till färglös . Sedan en andra fläck tillämpas , i en kontrasterande färg som rosa , och de gramnegativa celler blir rosa medan grampositiva celler kommer att hålla sin ursprungliga fläcken .
Historiska
Vissa bakterier har tjocka cellväggar består av lipider , byggstenarna i fett , vilket gör dem vaxartad och nästan vattentät . Detta innebär att en normal fläck kan inte tränga in i cellen . På 1880-talet , var forskarna försöker plugga Mycobacterium tuberculosis , de bakterier som orsakar tuberkulos . Det skulle dock inte hålla ett regelbundet Gramfärgning såvida det nedsänktes i fläcken i upp till 24 timmar. Paul Ehrlich , som senare utvecklade det första läkemedlet effektivt mot syfilis , utvecklade syrafasta färgning för att tvinga fläcken in bakterierna . Ehrlich metod tog bara 45 minuter , medan modern syrafasta färgningsteknik tar bara 5 minuter .
Metod
För att tvinga färgen , vanligen Carbol - fuksin , in i bakterierna måste den upphettas över en bägare med kokande vatten under 5 minuter, medan sliden ständigt översvämmad med fläck och inte tillåtas att torka ut. En alternativ metod för att värma upp är att använda modifierade Kinyoun Carbol fuksin fläck , som inte behöver värmas upp, men det är absolut nödvändigt att sliden inte torkar ut under 5 minuter nedsänkning i fläcken. Oavsett vilken primär färgningsmetod används , är glid avfärgas med syra alkohol - inte vanlig alkohol - och färgas med en sekundär motfärg av en annan färg för att visa de andra bakterier som kan finnas . Bakterier vars främsta fläckar kvar efter avfärgning med syra alkohol kallas syrafasta .
Organism försiktighets
Mycobacterium tuberculosis är extremt farligt , och är endast undersökts på sjukhus och kliniska anläggningar som har separata rum eller speciellt utformade överförings huvar för att förhindra kontaminering . Det är olagligt att använda den i en akademisk laboratorium . Istället är Mycobacterium smegmatis används , men det har en mycket tunnare cellvägg än M. tuberculosis , så det är lättare att av misstag över avfärga bilden och ta bort den primära fläcken .
Procedur försiktighet
Carbol - fuchsin ångor är giftiga , så när värma dem , använda ett dragskåp för att innehålla rök och ventilera dem utanför . Dessutom, för att undvika farorna med uppvärmnings slides Sammantaget Kinyoun Carbol fuksin kan användas i stället , som har en högre koncentration av fenol och fuksin , två aktiva ingredienserna i fläcken , och behöver inte värmas upp för att penetrera bakterierna. < Br > Addera
Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom