Hur Block Buffertar

Blockera buffertar används för att stabilisera belagda proteiner i immunanalyseroch enligt Immunokemisystem Technologies , de minskar buller i resultaten från enskilda analyser , öka analysens känslighet , öka effektiviteten och hållbarheten hos de belagda plattorna och öka reproducerbarhet . Block buffertar inhibera icke-specifik bindning efter proteiner och antikroppar har bundits ihop och absorberats på de belagda testplatta under en ELISA ( enzymkopplad immunabsorberande analys ) . Eftersom ELISA kan byggas på olika sätt , det finns flera val av blockerande buffertar för att möta en tekniker individuella behov . Detta är vad du behöver
Antibody prov
Protein prov
Assay platta
Blockering buffert
Laboratorie bägare
pipett
Visa fler Instruktioner
1

Välj din blockeringsbuffert beroende på vilken typ av ELISA du kommer att utföra . Val av buffert är: allmänna blockerare ( däggdjursprotein byggnadsställning ) för sandwich och antigen -down ELISA ; BB2 Neptunus blockering ( icke - däggdjursprotein byggnadsställning ) för mänskliga och arter däggdjur ELISA ; BB3 synblocks (små , ​​syntetiska molekylära ställningar ) för höghållfasta blockerande ELISA ; och BB4 fosf fria (små , ​​syntetiska , fosforfria molecular scaffolds ) för hög , icke-specifik enzymmärkt konjugat- bindande ELISA . Den BB4 buffert blockerare är särskilt användbar i analyser som använder alkaliskt fosfatas , kemiskt behandlat eller glasreaktionsplattoroch mikrofluidik , enligt uppgifter från Immunokemisystem Technologies , ett företag som levererar all relevant analysutrustning.
2

Coat analysplattan med antigen ( protein ) eller antikroppen genom att hälla lösningen över plattorna . Addera 3

Aspirera ( ta bort ) beläggningslösningen genom att tippa plattan så överskottet slängs in i en separat behållare.
4

pipett 300 till 400 mikroliter blockeringsbufferti varje brunn i analysplattan med användning av en pipett.
5

Inkubera lösningar för runt tre timmar eller över natten vid omgivningstemperatur ( 4 grader Celsius) . Enligt Cell Technology företaget, kommer den högra blockbuffert spara dina reagenser , vilket kan vara värdefullt för att de är dyra och kan vara en bristvara .
6

Tvätta mycket protein för att ta bort överskjutande belopp som detta kan minska upptäcka ditt mål antigen , enligt uppgifter från Pierce Net .
7

vid denna punkt , är klar reaktionen och du bör ha en färdig skylt som innehåller rätt mängd av antikropp bunden till antigen , vilket ger konsekventa resultat och minska plåt - till-plåt variation i stora jämförande analyser .
8

i fallet med en microarray , använda en avancerad blockeringslösningsåsom Array det är Block det Buffer , som har utformats speciellt för att inaktivera eventuella reaktiva grupper som kvarstår efter en "print" av substrat på objektglas innehållande super -epoxi , super -amin och super- aldehyd med bibehållen skärpa i resulterande signalen , vilket förhindrar fluorescens och underlättande brusreducering. Detta reagens har en hållbarhet på ett år om korrekt lagrad , är extremt ren och tillhandahålls som en färdig att använda koncentrat . Addera