uttryck av proteiner är mycket enkelt produktion av ett protein från en definierad aminosyrasekvens , som i sin tur bestäms av en definierad gensekvens. Att förstå dessa sekvenser tillåter en undersökare att modifiera ett protein på olika sätt - till exempel genom att placera en fluorescerande markör på proteinet så att den kan detekteras , eller genom att ta bort delar av proteinet som kan störa dess framställning eller bearbetning av en cell .
Metoder och verktyg för analys av Protein Expression
Protein uttryck analyseras med hjälp av mycket avancerade och specialiserade tekniker och procedurer , såsom ELISA , Immunoassays , masspektrometri , och bildhantering . I de flesta fall är proteinet indirekt detekteras - till exempel genom att använda en antikropp som binder till den och sedan använda en sekundär detektionssystem för att visualisera den. En grundläggande proteindetekteringsteknikenär det av Western blotting , under vilken ett protein körs genom en agarosgel och överfördes sedan på ett membran . Det är då " sonderades " genom att låta en antikropp att binda till det, och antikroppen bringas sedan att reagera med en kemisk lösning , såsom en silverfärg , för att producera en bild av proteinets läge på blotten. Detta ger en indikation på storleken av det protein och om det är närvarande som flera eller enstaka enheter . En annan vanlig metod är fluorescerande upptäckt . Bindningen av en antikropp märkt med en fluorescerande partikel till proteinet gör det möjligt att visualiseras genom mikroskopi . Addera syfte att analysera Protein Expression
Studera uttrycket av ett protein ger en utredare en indikation på var den produceras (det vill säga , dess uttrycksmönsteroch lokalisering ) eller dess mängder ( dvs. dess vävnad eller cell- nivå ) . Denna information används vid diagnostisk patologi i , till exempel, på detektering av protein i urin bestämma huruvida en patient har njursjukdomar såsom tubulär njursjukdom eller diabetesnefropati. I genetiska laboratorier gen kloningsexperiment brukar generera rekombinanta ( genetiskt förändrade ) proteiner . Analysen av dessa syntetiska molekyler är av avgörande betydelse i kontrollen av gensekvenser eller kontroll med avseende på mutationer som kan eller inte kan vara önskvärda . Till exempel vacciner är proteiner som produceras artificiellt modifierade enheter av gener. Dessa proteiner måste analyseras noga för att se till att generna ändrades i rätt och önskat sätt , för att undvika oönskade biverkningar eller toxiska effekter .
Protein Expression Analys av Western blotting
analys av proteinuttryckmed hjälp av Western blotting är ett mycket rutinmässigt laboratorieförfarandeför att forskare att utvärdera gen kloning och rekombinant proteinproduktion . Till exempel, i molekylär biologi och genteknik, är gener från olika arter (t.ex. mus och människa ) samman och placerades i en bakteriecell , som har förmåga att uttrycka proteinet. För att säkerställa att det korrekta proteinet genereras måste dess expression analyseras med Western blotting . Western blotting används också i medicinsk patologi att diagnostisera galna ko-sjukan och HIV. Addera Protein Expression Analys genom flödescytometri
Flödescytometri kräver celler som skall färgas med en fluorescerande antikropp , som binder till ett protein som uttrycks på ytan av eller inuti en cell. Det används i farmaceutisk forskning för att hitta molekyler ( cytokiner) som är unika för en specifik uppsättning av celler och är involverade i cellsignalering och kommunikation . Detta är viktigt så att effekten av läkemedel på normal cell fysiologi och funktion kan övervakas under läkemedelsutveckling och kliniska prövningar . Addera
Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom