Lysis är den handling genom vilken cellerna bokstavligen sönder, vilket gör deras innehåll för att spilla ut för analys . De celler som innehåller DNA-provet som skall extraheras måste öppnas , vilket tillåter oss att få tillgång till lysatet , eller att vätskan inuti. Detta uppnås genom ett flertal metoder , den vanligaste av dessa är sonikering . Sonikering är den process genom vilken kondenserad ljud matas till cellerna , vilket agiterar dem och bryta deras intermolekylära reaktioner. Andra metoder för att inducera lys innefattar att införa ett virus , vilket bryter den öppna inifrån ; enzymer som äter bort på dess yta ; och osmos, vilket innefattar placering av cellerna i vatten , vilket gör att vätskan i en av dem för att göra dess bort till utsidan, där den kan extraheras. Addera Membrane Avlägsnande
Därefter måste de lipider runt cellens membran tas bort . Lipider är olika typer av fetter , vaxer , monoglycerider , fosfolipider och andra naturligt förekommande molekylära ämnen som används som strukturella komponenter till cellmembran, vilket ger dem en viss stelhet . Dessa avlägsnas genom tvättning cellernas lysat i en rengöringslösning , vanligen en form av kromsyra . Addera Protein Borttagning
Efter lipiderna har tagits bort från den lysat , är det nu viktigt att undanröja eventuella återstående proteiner . Detta sker genom tillsättning av vad som kallas ett proteas . Ett proteas är en speciell enzym utformad för att bryta ner de givna proteinerna. Denna åtgärd kallas proteolys , medan proteas orsakar hydrolys (nedbrytning ) av de band som håller aminosyror tillsammans . Aminosyror utgör proteiner , och utan deras konfiguration , bryts proteinet ner . Addera Utfällningsmedel
Det är äntligen dags att se rent DNA . Detta kan ske genom doppning av lysatet i iskall alkohol , vanligen etanol. Eftersom DNA är olöslig i alkohol , kommer det att klumpa ihop sig. När blandningen rörs om med en metallsked , kommer DNA synligt linda runt metallen , som liknar vit bomull . Detta är känt som utfällning , med DNA som kallas DNA- fällning .
Isopropanol
Tillsammans med etanol , isopropanol också används ibland gör extrahera DNA fällning . På den positiva sidan , är det mer effektivt än etanol , vilket ger en högre koncentration av DNA när den används . Emellertid är det också mycket mindre flyktiga och kräver mer tid för att torka. Det kan också noteras att DNA inte kan hålla sig så väl till sked eller bandet när med isopropanol . Addera
Upphovsrätt © Hälsa och Sjukdom