Det första steget i direkta bakteriella färgningsförfaranden är beredning av ett utstryk. Celler från en kultur eller prov är spridda i en tunn film över ett glas objektglas, torkades och fixerades med användning av värme eller ett kemiskt fixativ. Fastställande av smeta fäster bakterierna till bilden och hindrar dem från att spolas bort under färgningsproceduren. Utstryk bör vara tillräckligt tunn för att tillåta granskning av enskilda celler och fixeras tillräckligt för att tillåta upprepade tvättningar under färgningsproceduren. Addera Fläckar
På grund av deras höga vattenhalt mikrober är nästan färglös. Färgning förstärker dem och avslöjar deras olika egenskaper. Fläckar är vanligtvis salter består av laddade partiklar som kallas joner. När det blandas med vatten, en dissocierar salt i positivt laddade katjoner och negativt laddade anjoner. Fläckar är salter i vilka antingen katjoner eller anjoner är färgade. Beroende på vilken typ av jon bär färgen, vanliga mikrobiologiska fläckar är antingen basiska eller sura. Grundläggande fläckar innehåller färgade katjoner och färglösa anjoner. Exempel på grundläggande fläckar inkluderar metylenblått, grundläggande fuksin och kristallviolett. Sura fläckar har färgade anjoner och färglösa katjoner. Exempel inkluderar eosin, Congo röd och nigrosin.
Princip
Bakterier bär en svag negativ laddning. Därför drar de och binda positivt laddade grundläggande fläckar. Eftersom bakterierna själva behåller färgämnet, är processen en direkt färgningsmetod. En direkt fläck kan vara antingen enkla eller differential. Enkel färgning använder ett färgämne för att avslöja storlek, form och placering av bakterier. En differentiell fläck, såsom Gram-färgning, använder två olika färgade basiska färgämnen att skilja typer av bakterier utöver sina fysiska egenskaper. Indirekta, eller negativ färgningstekniker använder sura fläckar. Bakterierna repellera färgämnet och förblir färglös mot fläcken-kvarhållande bakgrund.
Fördelar
Direkt färgning av bakterieceller är den vanligast använda tekniken för att visualisera bakterier. Den är billig, enkel och relativt snabb. Denna teknik ger vårdpersonal med samma dag resultat, ett potentiellt livräddande fördel vid diagnostisering och behandling av vissa infektioner, såsom bakteriell meningit. Direkta utstryksprover är permanenta preparat som kan granskas på nytt vid ett senare tillfälle, om så är nödvändigt. Eftersom direkt färgning dödar bakterierna, är risken för smitta från hantering av smeta minskas.
Upphovsrätt © Liv och hälsa