Vanliga tillämpningar av PCR innefattar DNA-fingeravtryck (i vilken DNA-fragment isoleras och jämförs mot befintliga data), analys av extremt små provmängder (som gör det möjligt för forskare att rekonstruera utdöda organismer och avlidna historiska siffror) och sjukdomsdiagnos (inklusive virus-DNA och cancerforskning)
PCR Komponenter
Nödvändiga komponenter och reagens i en PCR-reaktion är:. genomisk DNA (mallen till replikera); två primers (en framåt och en bakåt) komplementära till DNA-templatet sekvensen, en reaktion cocktail (inklusive Taq-polymeras och en buffertlösning som ger en livskraftig miljö i vilket reaktionen kommer att inträffa), och substratet för enzymet Taq . (nukleotider som hjälper "bygga" de enskilda strängarna) Addera ditt steg av PCR
Stegen i reaktionen är: Denaturerings (under vilken temperaturen är höjas för att separera strängarna DNA-mall), glödgning av primern (under vilken temperaturen kyls för att uppmuntra fri-flytande primersekvensema att följa enstaka strängar DNA-mall), och Extension (under vilken Taq-polymeras fäster på primer och använder gratis -flytande nukleotider för att replikera varje isolerad sträng DNA-templat). Upprepa denna process flera gånger kommer att isolera varje replikerad sekvens från dess ursprungliga DNA-mall. Varje upprepning ökar exponentiellt mängden replikerade DNA tills det finns en tillräcklig mängd för önskad experimentet. För optimal temperatur och andra förhållanden, se Yale University "Designing PCR Program" i Resources nedan.
Stages of PCR
Reaktionen också kan beskrivas i tre steg : Amplifiering (under vilket DNA exponentiellt replikeras), nivå-Off (under vilken Taq-polymeras förlorar aktivitet) och platån (vid vilken tid ingen mer produkt kan produceras i den aktuella reaktionen). För en interaktiv demonstration av PCR-reaktionen, se University of Utah "PCR Virtual Lab" i Resources nedan.
Upphovsrätt © Liv och hälsa