Konfokal scanning mikroskopi används av forskare inom biologisk vetenskap och andra branscher för att få en bild av den tredimensionella strukturen för ett prov, t.ex. en cell eller vävnad. Dessutom är det förfarande som används för att observera den mikroskopiska strukturen av ett prov som av någon anledning inte kan skivas i sektioner förväg. Trots dessa utmaningar kan mötas genom att använda en komplex datorbaserat program bildbehandling, är denna metod långsam och kräver en hel del datorkraft.
Konfokalmikroskopi vs Standard ljusmikroskopi
Om ett tjockt prov ses med ett konventionellt ljusmikroskop, är bilden som erhålls genom att fokusera på någon specifik plan som förvärras av suddiga, out-of-focus avläsningar som kommer från de delar av provet som ligger över och under fokalplanet. För vanligt ljusmikroskop för att fungera bra, måste ett prov skivas i tunna sektioner som skall analyseras, och sektionens tjocklek är omvänt proportionell mot bildens klarhet. Dock är möjligen värdefull information om den tredje dimensionen förloras när ett prov är sektionerad och, som nämnts, kan vissa prover inte vara sektionerad lätt alls.
Så fungerar
konfokala scanning mikroskop fokuserar på en specifik plan i ett tjockt prov samtidigt förkasta ljus som kommer från out-of-focus regioner ovanför och nedanför detta plan. Detta resulterar i en ren "optisk avsnitt," och från en sekvens av dessa sektioner tagna på olika djup, kan ett datorprogram rekonstruera en tredimensionell bild. Denna strategi är ganska likt vad en CAT scanner gör för röntgenläkare undersöker en hel människokropp, eftersom båda metoderna presentera rena snittvyer av en intakt struktur interiör
Så fungerar det:. The Detaljer
Enheten används vanligen med fluorescensoptik, och vid varje tillfälle maskinens optiska systemet fokuserar sin spotlight på en enda punkt på ett visst djup i provet. En extremt ljusstark källa Pinpoint belysning behövs, och detta är vanligtvis från en laser vars ljus passerar genom ett hål. En detektor utrustad med en pinhole öppning samlar den fluorescens som emitteras från det belysta provet. Bara ljuset från den specifika fokuspunkten kommer in i detektorn, och enheten utesluter ljus som kommer från områden utanför plan fokus.
Specifika användningsområden
konfokal skanning mikroskop används ofta för att lösa strukturen av olika komplexa tredimensionella objekt, till exempel nätverk av cytoskeletal fibrer i cellers cytoplasma, och arrangemang av kromosomer och gener i en cell nucleus under olika punkter i celldelningscykeln. Pollenkorn, till exempel, har en komplex skulpterat cellvägg, som bara kan ses tydligt med konfokalmikroskopi. Elektronikindustrin använder också denna maskin och metodik för att inspektera halvledare.
Upphovsrätt © Liv och hälsa