Vad är syftet med syrafasta färgning?

I mikrobiologi, färgning en bakterie betyder att färga det med ett färgämne för att se det tydligare under ett mikroskop. Om bakterier inte är färgade, verkar de klar och färglös, och det är svårt att se deras form. Bortsett från sina former, är hur lätt bakterier färgas med vissa fläckar - om alls - ofta ger en ledtråd för att identifiera bakterier. Syrafasta färgningen är en typ av färgning som är effektiv på vissa bakterier som inte kan färgas av andra metoder. Differential Färgning

att färga ett normala bakterier, flytande fläck appliceras på bilden i ungefär en minut, sedan sköljas bort med vatten. Differential färgning använder olika fläckar för två olika bakterier i samma glas. Till exempel i en Gram-färgning är sliden först färgades med kristallviolett och jod, därefter avfärgades med alkohol. Celler som är grampositiva kommer att behålla den mörklila färgen på den första fläcken även efter det att alkoholen används, medan Gram-negativa celler återgår till färglös. Sedan en andra fläck appliceras i en kontrasterande färg som rosa, och Gram-negativa celler blir rosa när de Gram-positiva celler kommer att hålla sin ursprungliga färg.
Historik

Vissa bakterier har tjocka cellväggar består av lipider, byggstenarna i fett, vilket gör dem vaxartad och nästan vattentät. Detta innebär en normal fläcken inte kan tränga in i cellen. På 1880-talet, var forskarna försöker plugga Mycobacterium tuberculosis, bakterien som orsakar tuberkulos. Men skulle det inte hålla en regelbunden Gramfärgning såvida det var nedsänkt i fläcken i upp till 24 timmar. Paul Ehrlich, som senare utvecklade den första drogen effektiva mot syfilis, utvecklade syrafasta färgning för att tvinga fläcken in bakterierna. Ehrlich metod tog bara 45 minuter, medan modern syrafasta målningsteknik tar bara 5 minuter.
Metod

att tvinga färgen, oftast Carbol-fuksin , in i bakterierna, ska den upphettas över en bägare med kokande vatten i 5 minuter, medan sliden ständigt översvämmad med fläck och inte tillåtas att torka ut. En alternativ metod för värme är att använda modifierade Kinyoun Carbol fuksin fläck, som inte behöver värmas upp, men det är absolut nödvändigt att sliden inte torkar ut under 5 minuter nedsänkning i fläcken. Oavsett vilken primär färgning metoden används, är sliden avfärgas med syra alkohol - inte vanlig alkohol - och färgades med en sekundär motfärg av en annan färg för att visa de andra bakterier som kan förekomma. Bakterier vars primära fläckar kvar efter avfärgning med syra alkohol kallas syrafasta.
Organism försiktighetsåtgärd

Mycobacterium tuberculosis är extremt farligt, och är endast undersökts på sjukhus och kliniska anläggningar som har separata rum eller specialutformat huvar överföring att förhindra kontaminering. Det är olagligt att använda det i en akademisk laboratorium. Istället är Mycobacterium smegmatis används, men det har en mycket tunnare cellvägg än M. tuberculosis, så det är lättare att av misstag över-avfärga bilden och ta bort den primära fläcken.
Processuella försiktighetsåtgärd

Carbol-Fuchsin är giftiga, så när värma dem, använda ett dragskåp för att innehålla rök och ventilera dem utanför. Dessutom, för att undvika farorna med uppvärmning diabilder helt och hållet, kan Kinyoun Carbol fuksin användas i stället, som har en högre koncentration av fenol och fuksin, två aktiva ämnena i fläcken, och behöver inte värmas för att tränga in i bakterier.
Addera ditt