Katarina av Aragonien dog av cancer, även om den exakta typen av cancer inte är känd. Hon hade lidit av ohälsa en tid före sin död och hade behandlats för en mängd olika åkommor, inklusive ett svullet knä och hosta. Under de sista månaderna av sitt liv blev hon allt svagare och svagare och gick så småningom bort den 7 januari 1536.