Varför görs krossning i TCA-lipidperoxidationstest?

I analysen av tiobarbitursyrareaktiva substanser (TBARS) för lipidperoxidation utförs krossning av vävnadsprovet av flera skäl:

För att underlätta homogenisering:Att krossa vävnadsprovet hjälper till att bryta ner de cellulära strukturerna och frigöra lipiderna i det omgivande mediet. Denna homogeniseringsprocess säkerställer att lipiderna är jämnt fördelade och tillgängliga för reaktion med tiobarbitursyra (TBA).

För att förbättra lipidextraktionen:krossning av vävnadsprovet ökar lipidernas yta, vilket möjliggör bättre extraktion i det organiska lösningsmedlet (vanligtvis en blandning av kloroform och metanol) som används i TBARS-analysen. Detta steg är avgörande för att isolera lipiderna från andra cellulära komponenter och underlätta deras reaktion med TBA.

För att frigöra lipidperoxidationsprodukter:Att krossa vävnadsprovet kan hjälpa till att frigöra lipidperoxidationsprodukter, såsom malondialdehyd (MDA), som ofta är bundna till cellulära proteiner eller andra makromolekyler. Genom att störa dessa bindningar möjliggör krossning frigöring och efterföljande kvantifiering av MDA och andra TBARS.

Genom att krossa vävnadsprovet optimeras homogeniseringen, lipidextraktionen och frisättningen av lipidperoxidationsprodukter, vilket leder till mer exakta och tillförlitliga mätningar av lipidperoxidation i TBARS-analysen.