Agarosgel är den vanligaste metoden för att visualisera DNA. Olika procentsatser av agaros kan användas beroende på storleken av det DNA som skall visualiseras. En låg procentandel agaros, såsom 0,7 procent , har upplösning för att visualisera stora DNA-fragment . En högre andel , t.ex. 2 procent , används ofta för att visualisera små fragment av DNA. För att visualisera DNA, etidiumbromid används ofta som den interkalerar med DNA och fluorescerar i UV-ljus.
Polyacrylamide
Polyakrylamidgeler används för att separera DNA-fragment som är så små som 10 baspar upp till 1 kb . Dessa geler har en liten separationsintervallmen med en hög upplösning . Men de är också mer komplicerat att framställa . Det är också möjligt att ladda stora mängder DNA , utan att påverka upplösningen. Som med agaros, etidiumbromid används ofta för att visualisera DNA-fragmenten , men polyakrylamid kan utsläcka fluorescens, vilket gör det svårt att visualisera små mängder DNA . Addera puls -Field
Denna form av elektrofores används för att separera stora DNA-molekyler och används ofta för genotypning . Stora DNA-fragment migrerar i ungefär samma takt . Det kan vara svårt , därför att lösa olika band. Pulse- fältet elektrofores alternerar det elektriska fältet. Detta möjliggör större separation och upplösning av DNA .
Kapillär
Kapillärelektrofores är en snabb och känslig metod för att separera DNA . Små mängder DNA kan lösas . DNA kan visualiseras med fluorescerande märkning eller med hjälp av UV-ljus . Addera Denaturing
Separationen av DNA kan kompliceras av dess struktur . Det är möjligt med användning av karbamid och formamid för att förstöra strukturen genom att sänka smältpunkten för DNA. Detta kan användas i både agaros- och polyakrylamidgeler.
Överväganden
elektroforesmetod som väljs kommer att bero på storleken av DNA-fragmenten som skall separeras. Hur DNA kommer att användas efter separation kommer också att avgöra den slutliga metoden . Addera
Hälsa och Sjukdom © https://www.sjukdom.online